常见问题
1. 为什么我的色谱图显示峰尾?
出现峰尾的原因有很多。问题可以根据以下方案进行识别:
●质量过载:当注入较少的样品量(质量)时,峰值变得更加对称或分解成两个单独的峰。使用更稀释的注射样品来纠正这种情况。事实上,带有前端的圆形尖顶通常是超载柱的典型表现。
二次相互作用:当注入中性化合物(苯乙酮、甲苯)时,峰变得对称。调整流动相pH值以中和带电分析物。
对于较大内径柱(>10 mm),径向温度梯度也会引起峰尾。为了避免这样的问题,建议使用塔式烘箱。
如果上述两种情况都不存在,则尾流也可能是由柱填料过程中的不规则性(优先路径)、柱入口处的空隙或部分堵塞的入口块导致不规则的流动剖面/路径引起的。如果是填充不良的色谱柱,则将其清空并用不同的浆液/溶剂/压力组合重新包装,并重新测试以检查是否解决了问题。如果是部分堵塞的熔块,请仔细更换熔块,确保不干扰柱床表面并重新测试。熔块也可以被移除,在甲醇中进行超声处理,并在塔接头中更换。
2. 什么原因导致高效液相色谱中的基线漂移?
●柱温波动。(即使是很小的变化也会使循环基线上升和下降。折射率和电导率探测器,高灵敏度或间接光度模式的紫外线探测器最常受到影响。)
●非均匀流动相。(从温度波动漂移到更高的吸光度,而不是循环模式。)
●检测单元内有污染物或空气积聚。
●探测器出线连接。(小区窗口的高压间隙,产生了嘈杂的基线。)
●流动相混合问题或流量改变。
●慢柱平衡,特别是在调整移动步长时。
●流动相污染、变质或来自低质量溶剂。
●样品中强保存的物质可以被解释为非常宽的峰,倾向于上升基线。(梯度分析可能会使问题变得更糟。)
●不建议使用回收溶剂。未经调整的探测器。
●检测器(UV)不是安装在最高吸光度处而是曲线角度。
3. 为什么液体输送不稳定,泵有明显的脉动?
●泵头内部产生气泡
●以前的流动相仍在泵头
●管道内部产生气泡
●止回阀工作不正常
●液体从泵头与泵头固定座之间的间隙泄漏,或从清洗流道泄漏
●液体从流路连接处泄漏
●流道(部分)堵塞
●柱塞密封圈磨损快
4. 单向阀的主要故障有哪些?
●单向阀安装在泵头上,其工作状态直接影响溶剂输送的准确性。当出现异常输液时,需要清洗单向阀。
●单向阀位于泵扬程内,该结构在主泵扬程下安装一个单向阀,可以用任意工具打开上下阀体,取出单向阀。
5. 泵垫圈损坏的迹象是什么?
●高压下压力不稳定。
●流动相从泵头泄漏。一般反映样品保留时间的变化。一个泄漏的垫片就像一个压力调节器,到了一定压力的高压线压力就不会上去,部分液体在垫片内流动部分泄漏。
6. 为什么在进行高效液相色谱分析时系统中没有压力?
●流动相粘度过高,被污染。建议选择合适的流动相和比例,重新配置,使用0.45微米的过滤膜进行过滤。
●流动相中的缓冲盐导致单向阀堵塞。设置流量为5mL/min,松开排气阀,吹扫。
●泵内有气体,设定流量为5mL/min,松开排气阀,进行排气。
●高压密封垫片变形,建议更换新的。
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